Hogyan történik a kariotípus teszt?

Ha orvosa kariotípus-tesztet ajánlott Önnek vagy gyermekének, vagy amniocentézis után, mit jelent ez a vizsgálat? Milyen körülmények között diagnosztizálható egy kariotípus, milyen lépések történnek a vizsgálatok elvégzésében, és milyen korlátozások vannak?

Mi a kariotípus teszt?

A kariotípus a sejt kromoszómáinak fényképe. A kariotípusok a vérsejtekből, magzati bőrsejtekből (a magzatvízből vagy a placentából) vagy a csontvelősejtekből származnak.

Milyen feltételeket lehet diagnosztizálni egy kariotípus teszt segítségével?

A kariotípusok felhasználhatók a kromoszóma-rendellenességek, mint például a Down-szindróma szűrésére és megerősítésére, és számos különböző típusú eltérést lehet kimutatni.

Ezek közül az egyik a triszómiák, amelyekben a kromoszómák közül kettőnek két példánya van. Ezzel szemben a monoszómák akkor fordulnak elő, ha csak egy példány van (két helyett). A triszómiák és monoszómák mellett vannak kromoszóma-deléciók, amelyekben egy kromoszóma egy része hiányzik, és a kromoszóma transzlokációk, amelyekben az egyik kromoszóma egy része kapcsolódik egy másik kromoszómához (és fordítva, kiegyensúlyozott transzlokációkban).

A triszómiák példái a következők:

• Down-szindróma (21-es triszómia)
• Edward-szindróma (18-as triszómia)
• Patau-szindróma (13. triszómia)
• Klinefelter-szindróma (XXY és egyéb variációk) - Klinefelter-szindróma 500 újszülött férfi közül 1-ben fordul elő, és úgy tűnik, hogy egyre gyakrabban fordul elő
• Triple X szindróma (XXX)

Egy monoszómia példája:

• Turner-szindróma (X0) vagy monoszómiás X - A vetélés mintegy 15% -át Turner-szindróma okozza, de ez a triszómia csak 2000-ben élő születéskor kb.

A kromoszóma-deléciók példái a következők:

• Cri-du-Chat szindróma (hiányzik az 5. kromoszóma)
• Williams-szindróma (hiányzó kromoszóma 7)

Fordítások - Számos példa van a transzlokációra, beleértve a transzlokációs Down szindrómát. A Robertsonian transzlokációk meglehetősen gyakoriak, 1000 emberből körülbelül 1-ben fordulnak elő.

A mozaikizmus olyan állapot, amelyben a szervezet egyes sejtjei kromoszómás rendellenességgel rendelkeznek, míg mások nem. Például a mozaik Down-szindróma vagy a mozaik-triszónia 9. A 9-es teljes triszómia nem kompatibilis az életvel, de a 9-es mozaik-triszónia élő születést eredményezhet.

(Például ezer szó érhető el. Ismerje meg a transzlokáció, a triszómia és a mozaik Down-szindróma közötti különbségeket.)

Mikor kész a kariotípus?

Számos olyan helyzet áll fenn, amikor az orvos orvosa javasolhatja a kariotípust. Ezek a következők lehetnek:

• Azok a csecsemők vagy gyermekek, akiknek orvosi rendellenességük olyan kromoszóma-rendellenességre utal, amely még nem diagnosztizált.
• Felnőttek, akiknek a kromoszómás rendellenességre utaló tünetei vannak (például a Klinefelter-betegségben szenvedő férfiak serdülőkorig vagy felnőttkorig diagnosztizálhatatlanok lehetnek.) A mozaik trisomiás rendellenességek némelyike ​​is diagnosztizálhat.
• Meddőség - genetikai kariotípust lehet tenni a meddőségért. Amint azt fentebb már említettük, néhány kromoszóma-rendellenesség felnőttkorig diagnosztizálhat. Egy Turner-szindrómás nő, vagy egy ember, akinek egyikét a Klinefelter-féle variáns, nem feltétlenül ismeri az állapotot, amíg nem kezeli a meddőséget.
• Prenatális vizsgálatok - Egyes esetekben, mint például a Down-szindróma, az állapot örökletes lehet, és a szülők tesztelhetők, ha a gyermek Down-szindrómával született. (Fontos megjegyezni, hogy a Down-szindróma nagy része nem örökletes rendellenesség, hanem véletlen mutáció.)
• Születési idő - A karyotípust gyakran a csecsemő után végzett vizsgálat részeként végzik.

• Ismétlődő vetélések - Az ismétlődő vetélések szülői kariotípusa nyomokat adhat a pusztító ismétlődő veszteségek okaira. Úgy gondolták, hogy a kromoszóma-rendellenességek, mint például a 16-as triszómia, a vetélés legalább 50% -ának oka.
• Leukémia - A leukémiák diagnosztizálásának elősegítésére is végezhetünk kariotípus-tesztelést, például a krónikus myelogén leukémia vagy akut limfocitás leukémia esetén talált Philadelphia kromoszómát keresve.

A kariotípus tesztben részt vevő lépések

A kariotípus-teszt egy egyszerű vérvizsgálatnak tűnik, ami sok embert csodálkozik, hogy miért tart sokáig az eredmények elérése. Ez a teszt valójában elég bonyolult a gyűjtés után. Vessünk egy pillantást ezekre a lépésekre, hogy megérthessük, mi történik a tesztelés ideje alatt.

1. Mintagyűjtés

A kariotípus végrehajtásának első lépése a minta összegyűjtése. Újszülöttekben vörösvértesteket, fehérvérsejteket, szérumot és más folyadékot tartalmazó vérmintát gyűjtenek. A fehérvérsejteken, amelyek aktívan osztódnak (mitózis néven ismert állapot), kariotípust fogunk tenni.A terhesség alatt a minta lehet amniocentézis során összegyűjtött amnion folyadék, vagy a placenta egy darabja, amelyet a chorionos villi mintavételi teszt (CVS) során gyűjtöttek össze. A magzatvíz folyadék magzati sejteket tartalmaz, amelyeket kariotípus létrehozására használnak.

2. Szállítás a laboratóriumba

A kariotípusokat egy adott laboratóriumban, citogenetikai laboratóriumban végezzük - a kromoszómákat tanulmányozó laboratórium. Nem minden kórházban van citogenetikai labor. Ha a kórházban vagy az orvosi rendelőben nincs saját citogenetikai laboratórium, a vizsgálati mintát egy kariotípus-elemzésre szakosodott laboratóriumba küldik. A vizsgálati mintát speciálisan képzett citogenetikus technológusok, Ph.D. citogenetikusok vagy orvosi genetikusok.

3. A cellák elválasztása

A kromoszómák elemzéséhez a mintának olyan sejteket kell tartalmaznia, amelyek aktívan osztódnak. A vérben a fehérvérsejtek aktívan oszlanak meg. A legtöbb magzati sejt is aktívan oszlik meg. Miután a minta elérte a citogenetikai laboratóriumot, a meg nem osztott sejteket speciális vegyi anyagokkal választják el az elválasztó celláktól.

4. Növekvő sejtek

Annak érdekében, hogy elegendő mennyiségű sejtet elemezzünk, az osztódó sejteket speciális tápközegben vagy sejttenyészetben tenyésztjük. Ez a hordozó olyan vegyi anyagokat és hormonokat tartalmaz, amelyek lehetővé teszik a sejtek megosztását és szaporodását. Ez a tenyésztési folyamat három-négy napig tarthat a vérsejtek esetében, és akár egy hét a magzati sejtek esetében.

5. A cellák szinkronizálása

A kromoszómák az emberi DNS hosszú sztringjei. Ahhoz, hogy a kromoszómákat mikroszkóp alatt lássuk, a kromoszómáknak a legkevésbé tömör formában kell lenniük a metafázisnak nevezett sejtosztódás (mitózis) fázisában. Annak érdekében, hogy az összes sejtet a sejtosztódás e specifikus szakaszába juttassuk, a sejteket olyan vegyszerrel kezeljük, amely megállítja a sejtek osztódását abban a pontban, ahol a kromoszómák a legkompaktabbak.

6. A kromoszómák felszabadítása a sejtekből

Ahhoz, hogy mikroszkóp alatt láthassuk ezeket a kompakt kromoszómákat, a kromoszómáknak ki kell zárniuk a fehérvérsejteket. Ezt úgy végezzük, hogy a fehérvérsejteket speciális megoldással kezeljük, ami rontja őket. Ezt úgy végezzük, hogy a sejtek mikroszkopikus csúszkán vannak. A fehérvérsejtek maradék törmelékét el kell mosni, így a kromoszómák elakadnak a diahoz.

7. A kromoszómák festése

A kromoszómák természetesen színtelenek. Annak érdekében, hogy egy másik kromoszómát meg lehessen mondani, egy speciális festék, amelyet Giemsa festéknek neveznek, a lemezre kerül. A Giemsa festék a kromoszómákat olyan régiókban rejti, amelyek gazdagok az adenin (A) és a timin (T) bázisokban. Amikor festett, a kromoszómák olyanok, mint a világos és sötét sávok. Minden kromoszómának van egy világos és sötét sávja specifikus mintája, amely lehetővé teszi a citogenetikus számára, hogy egy kromoszómát másról tudjon meg. Minden sötét vagy világos sáv több száz különböző gént tartalmaz.

8. Elemzés

A kromoszómák festése után az elemzéshez a mikroszkóp alá helyezzük a csúszkát. Ezután képet készítünk a kromoszómákról. Az elemzés végére a kromoszómák teljes számát határozzuk meg és a kromoszómákat méret szerint rendezzük.

9. Kromoszómák számlálása

Az elemzés első lépése a kromoszómák számítása. A legtöbb embernek 46 kromoszóma van. A Down-szindrómában szenvedő embereknek 47 kromoszóma van. Az is lehetséges, hogy az embereknek hiányzó kromoszómák, több mint egy extra kromoszóma, vagy egy kromoszóma egy része hiányzik, vagy kettős. A kromoszómák számát tekintve különböző állapotok diagnosztizálhatók, beleértve a Down-szindrómát.

10. A kromoszómák rendezése

A kromoszómák számának meghatározása után a citogenetikus elkezdi rendezni a kromoszómákat. A kromoszómák rendezéséhez a citogenetikus összehasonlítja a kromoszómák hosszát, a centromerek elhelyezését (a két kromatidot összekötő területeket), valamint a G-sávok helyét és méretét. A kromoszóma-párokat a legnagyobb (1-es) számtól a legkisebbig (22. szám) számozzuk. 22 kromoszóma-pár van, amelyeket autoszómáknak neveznek, amelyek pontosan megfelelnek. Vannak a nemi kromoszómák is, a nőstényeknek két X kromoszóma van, míg a férfiak X és a Y.

11. A szerkezet áttekintése

A kromoszómák és a nemi kromoszómák teljes számának vizsgálata mellett a citogenetikus a specifikus kromoszómák szerkezetét is megvizsgálja annak biztosítására, hogy nincsenek hiányzó vagy további anyagok, valamint szerkezeti rendellenességek, mint például a transzlokációk. A transzlokáció akkor következik be, amikor az egyik kromoszóma egy másik kromoszómához kapcsolódik. Bizonyos esetekben két darab kromoszómát cserélnek ki (kiegyensúlyozott transzlokáció), máskor pedig egy extra darabot adnak hozzá vagy hiányoznak az egyik kromoszómából.

12. A végeredmény

Végül a végső kariotípus a kromoszómák, a nemek és az egyes kromoszómák bármely szerkezeti rendellenességének teljes számát mutatja. A kromoszómák digitális képét a számok szerint elrendezett összes kromoszóma képezi.

A kariotípus tesztelés korlátai

Fontos megjegyezni, hogy míg a kariotípus-tesztelés sok információt adhat a kromoszómákról, ez a teszt nem tudja megmondani, hogy vannak-e olyan specifikus génmutációk, mint amilyenek a cisztás fibrózist okozó betegek. A genetikai tanácsadó segíthet megérteni, hogy a kariotípusos tesztek meg tudják mondani, és mit nem tudnak. További vizsgálatok szükségesek a génmutációk betegségben vagy vetélésben való lehetséges szerepének értékeléséhez.

Fontos megjegyezni, hogy néha a kariotípus-tesztelés nem képes kimutatni bizonyos kromoszóma-rendellenességeket, mint pl.

A jövő

Jelenleg a prenatális környezetben végzett kariotípusvizsgálat meglehetősen invazív, amniocentézist vagy chorion villus mintavételt igényel.Vizsgálatok folynak az anyai vérmintában lévő sejtmentes DNS értékelésekor, mint sokkal kevésbé invazív alternatíva a magzat genetikai rendellenességeinek prenatális diagnózisára.

Alsó sor a kariotípus eredményeinek várakozására

A kariotípus eredményeinek várakozásakor nagyon idegesnek érzi magát, és az eredmények eléréséhez szükséges hét vagy két olyan, mint az eonok. Vegyük az időt, hogy támaszkodj a barátaidra és a családodra. Hasznos lehet az abnormális kromoszómákkal kapcsolatos egyes állapotok megismerése is. Bár sok kariotípus által diagnosztizált állapot pusztító lehet, sokan élnek ilyen körülmények között, akiknek kiváló életminőségük van.